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उत्पाद विवरण:
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| प्रमुखता देना: | वास्तविक समय पीसीआर पता लगाने वाला अभिकर्मक,फ्रीज-ड्राई पाउडर पीसीआर डिटेक्शन रिएजेंट |
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LyoDt® क्रोनोबैक्टीर फ्रीज-ड्राइंग पाउडर के लिए रीयल-टाइम पीसीआर डिटेक्शन रिएजेंट
1.परिचय
क्रोनोबैक्टरजीवाणुओं की एक नई परिभाषा जीनस है, जिसका पूर्ववर्ती हैएंटेरोबैक्टर साकाजाकी क्रोनोबैक्टरयह एक गंभीर खाद्य रोगजनक है जो मुख्य रूप से दूषित शिशु फार्मूला के माध्यम से फैलता है, जिससे नवजात मेनिन्जाइटिस, सेप्सिस और नेक्रोटाइजिंग एंटेरोकोलाइटिस होता है। मृत्यु दर 80% तक पहुंच सकती है।
यह उत्पाद एक फ्रीज-ड्राइंग रीयल-टाइम पीसीआर अभिकर्मक हैक्रोनोबैक्टरयह अत्यधिक संरक्षित ompA जीन का उपयोग करता हैक्रोनोबैक्टरयह टेम्पलेट डीएनए को छोड़कर सभी आवश्यक अवयवों वाला मास्टरमिश्रण है, और इसे उपयोग में आसानी के लिए पीसीआर ट्यूबों में एकल परीक्षण के रूप में पूर्व-वितरित किया जाता है।इस उत्पाद को परिवहन और भंडारण के लिए शीत श्रृंखला की आवश्यकता नहीं है, जो शिपिंग लागत को काफी कम करता है, और अभिकर्मक अपशिष्ट और एयरोसोल संदूषण के कारण संभावित नुकसान को समाप्त करता है।
2विनिर्देश और संरचना
| बिल्ली नहीं। | विवरण | QTY |
| FP-DA-01 | लिओड्ट®फ्रीज-ड्राई रीयल-टाइम पीसीआर डिटेक्शन रिएजेंटक्रोनोबैक्टर | 48 परीक्षण |
| FP-DA-01PC | सकारात्मक नियंत्रण | 1 ट्यूब |
| EP-CM-10 | फिर से बंद करने योग्य प्लास्टिक बैग | 1 बैग |
3. भंडारण और शेल्फ जीवन
परिवेश के तापमान (5-30°C) पर रखें। यह 12 महीने तक स्थिर रहता है। एक बार वैक्यूम पैकेज खोलने के बाद, कृपया प्रदान किए गए पुनः सील करने योग्य प्लास्टिक बैग में निर्जलीकरण के साथ अप्रयुक्त उत्पादों को स्टोर करें,और एल्यूमीनियम पन्नी बैग में.
सावधानीः
अभिकर्मक गोली को छोटा होने से संकेत मिलता है कि नली में नमी घुस रही है और अभिकर्मक नम हो गया है।सामान्य से काफी छोटे पेलेट आकार वाले किसी भी अभिकर्मकों को उपयोग से पहले फेंक दिया जाना चाहिए या सकारात्मक नियंत्रण के साथ परीक्षण किया जाना चाहिएनमूना परीक्षण के लिए.
4अतिरिक्त उपकरण और अभिकर्मकों की आवश्यकता है
1) वास्तविक समय पीसीआर उपकरण
2) पाइपेट्स और टिप्स
3) न्यूक्लेज़ मुक्त जल
4) न्यूक्लिक एसिड निकासी किट
5. संगत वास्तविक समय पीसीआर प्रणाली
एबीआई 7500/फास्ट, रोश लाइटसाइक्लर 480II, बायोराड सीएफएक्स 96, बायोर लाइनजेन 9600.
6. स्वीकार्य नमूने
खाद्य संवर्धन शोरबा, उल्टी, दस्त के नमूने आदि।
7. परिचालन प्रक्रिया
1) न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण
उचित निकासी किट का उपयोग करके नमूनों से डीएनए निकालें।यह सिफारिश की जाती है किडीएनएलगभग 100μl एलुशन बफर के साथ एलुटेड है(टीईयान्यूक्लेज़ मुक्त एच2O) अंतिम चरण मेंनिकासी.शुद्ध न्यूक्लिक एसिड को तुरंत इस्तेमाल किया जाना चाहिए या -20°C पर संग्रहीत किया जाना चाहिए।
2) सकारात्मक नियंत्रण तैयारी
पॉजिटिव कंट्रोल को रिहाइड्रेशन से पहले परिवेश के तापमान पर 12 महीने तक रखा जा सकता है। इसे उपयोग से पहले 250 μl TE बफर या न्यूक्लेज़ मुक्त H जोड़कर रिहाइड्रेट किया जाना चाहिए।2O, 15-20 सेकंड के लिए कम गति पर घुमावदार और 15-20 सेकंड के लिए कम गति पर केन्द्रापसारित। तुरंत उपयोग करें या -20°C पर स्टोर करें।
3) रीयल-टाइम पीसीआर मिश्रण तैयारी
A) वैक्यूम पैकेज खोलें और अभिकर्मक युक्त 8-ट्यूब स्ट्रिप्स निकालें। जांचें कि गोली ट्यूब के नीचे है (यदि आवश्यक हो तो आवश्यक ट्यूबों की संख्या काट लें) ।यदि प्रदान किए गए ट्यूब आपके उपकरण के साथ संगत नहीं हैं, रिएजेंट पेलेट को अपने उपकरण के साथ संगत एक ऑप्टिकल ट्यूब में स्थानांतरित करें।
B) ट्यूबों को खोलें और ढक्कन (रियल-टाइम पीसीआर मशीनों के लिए उपयुक्त नहीं) को फेंक दें, और नीचे के रूप में बर्फ पर प्रतिक्रिया मिश्रण तैयार करें।
चरण कानिकासी.शुद्ध न्यूक्लिक एसिड को तुरंत इस्तेमाल किया जाना चाहिए या -20°C पर संग्रहीत किया जाना चाहिए।
2) सकारात्मक नियंत्रण तैयारी
पॉजिटिव कंट्रोल को रिहाइड्रेशन से पहले परिवेश के तापमान पर 12 महीने तक रखा जा सकता है। इसे उपयोग से पहले 250 μl TE बफर या न्यूक्लेज़ मुक्त H जोड़कर रिहाइड्रेट किया जाना चाहिए।2O, 15-20 सेकंड के लिए कम गति पर घुमावदार और 15-20 सेकंड के लिए कम गति पर केन्द्रापसारित। तुरंत उपयोग करें या -20°C पर स्टोर करें।
3) रीयल-टाइम पीसीआर मिश्रण तैयारी
A) वैक्यूम पैकेज खोलें और अभिकर्मक युक्त 8-ट्यूब स्ट्रिप्स निकालें। जांचें कि गोली ट्यूब के नीचे है (यदि आवश्यक हो तो आवश्यक ट्यूबों की संख्या काट लें) ।यदि प्रदान किए गए ट्यूब आपके उपकरण के साथ संगत नहीं हैं, रिएजेंट पेलेट को अपने उपकरण के साथ संगत एक ऑप्टिकल ट्यूब में स्थानांतरित करें।
B) ट्यूबों को खोलें और ढक्कन (रियल-टाइम पीसीआर मशीनों के लिए उपयुक्त नहीं) को फेंक दें, और नीचे के रूप में बर्फ पर प्रतिक्रिया मिश्रण तैयार करें।
| घटक | वॉल्यूम / परीक्षण |
| फ्रीज-ड्राइंग रिएजेंट | 1 ट्यूब (2μl) |
| नमूना डीएनए/सकारात्मक नियंत्रण/नकारात्मक नियंत्रण* | 23μl |
| कुल | 25μl |
* न्यूक्लेज़ मुक्त पानी का उपयोग नकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया जा सकता है।
घ) ट्यूबों को 10 से 15 सेकंड के लिए कम गति से घुमाएं, और 20 सेकंड के लिए 3000 आरपीएम पर सेंट्रिफ्यूज करें और उन्हें वास्तविक समय पीसीआर उपकरण में रखें।
2) आरटी-पीसीआर सेटअप
प्रतिक्रिया मात्रा को 25μl पर सेट करें, और पीसीआर प्रवर्धन प्रक्रिया नीचे दी गई है। 60 °C पर एफएएम फ्लोरोसेंस एकत्र करें, और निष्क्रिय संदर्भ के रूप में कोई भी चयन न करें।
| कदम | अस्थायी। | समय | चक्र |
| पूर्व विरूपण | 94°C | 3 मिनट | 1 |
| प्रवर्धन | 94°C | 10 सेकंड | 45 |
| 60°C | 40 सेकंड |
3) परिणाम विश्लेषण और व्याख्या
| टेम्पलेट | सीटी | व्याख्या |
| सकारात्मक नियंत्रण | CT≤35 | अभिकर्मक अच्छा. |
| नकारात्मक नियंत्रण | CT>40 या कोई CT नहीं | कोई संदूषण नहीं, प्रयोग मान्य है। |
| सीटी<35 | क्रॉस संदूषण, प्रयोग अमान्य। | |
35| एयरोसोल पीसीआर संदूषण, संदिग्ध (ग्रे क्षेत्र) नमूनों का पुनः परीक्षण करना आवश्यक है। |
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| नमूना | CT≤35 | क्रोनोबैक्टरसकारात्मक। |
35| क्रोनोबैक्टरसंशयित, पुनः परीक्षण द्वारा पुष्टि करें। |
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| CT>40 या कोई CT नहीं | क्रोनोबैक्टरनकारात्मक. |
व्यक्ति से संपर्क करें: Ms. Lisa
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