रियल टाइम पीसीआर द्वारा शिगेला का पता लगाने के लिए बिना कोल्ड चेन के आसान और परिवहन की पेशकश करने वाली खाद्य सुरक्षा रैपिड टेस्ट किट

LyoDt® शीगेल के लिए रीयल-टाइम पीसीआर डिटेक्शन रिएजेंट

1.विवरण

शिगेलयह एक ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया है और एक आम रोगजनक है जो मनुष्यों में आंतों की बीमारियों का कारण बनता है। यह चीन में संक्रामक दस्त रोगजनकों के प्रमुख कारण के रूप में रैंक करता है।संक्रमण मुख्य रूप से दूषित भोजन के सेवन से होता है (फैकल-ओरल मार्ग), जिसमें सबसे आम लक्षणों में दस्त (पानीदार मल), बुखार और मतली शामिल हैं।

यह उत्पाद एक फ्रीज-ड्राइंग रीयल-टाइम पीसीआर अभिकर्मक हैशिगेल.यह अत्यधिक संरक्षित ipaH जीन का उपयोग करता हैशिगेलयह टेम्पलेट डीएनए को छोड़कर सभी आवश्यक अवयवों वाला मास्टरमिश्रण है, और इसे उपयोग में आसानी के लिए पीसीआर ट्यूबों में एकल परीक्षण के रूप में पूर्व-वितरित किया जाता है।इस उत्पाद को परिवहन और भंडारण के लिए शीत श्रृंखला की आवश्यकता नहीं है, जो शिपिंग लागत को काफी कम करता है, और अभिकर्मक अपशिष्ट और एयरोसोल संदूषण के कारण संभावित नुकसान को समाप्त करता है।

2विनिर्देश और संरचना

3. भंडारण और शेल्फ जीवन

परिवेश के तापमान (5-30°C) पर रखें। यह 12 महीने तक स्थिर रहता है। एक बार वैक्यूम पैकेज खोलने के बाद, कृपया प्रदान किए गए पुनः सील करने योग्य प्लास्टिक बैग में निर्जलीकरण के साथ अप्रयुक्त उत्पादों को स्टोर करें,और एल्यूमीनियम पन्नी बैग में.

सावधानीः

अभिकर्मक गोली को छोटा होने से संकेत मिलता है कि नली में नमी घुस रही है और अभिकर्मक नम हो गया है।सामान्य से काफी छोटे पेलेट आकार वाले किसी भी अभिकर्मकों को उपयोग से पहले फेंक दिया जाना चाहिए या सकारात्मक नियंत्रण के साथ परीक्षण किया जाना चाहिएनमूना परीक्षण के लिए.

4अतिरिक्त उपकरण और अभिकर्मकों की आवश्यकता है

1) वास्तविक समय पीसीआर उपकरण

2) पाइपेट्स और टिप्स

3) न्यूक्लेज़ मुक्त जल

4) न्यूक्लिक एसिड निकासी किट

5. संगत वास्तविक समय पीसीआर प्रणाली

एबीआई 7500/फास्ट, रोश लाइटसाइक्लर 480II, बायोराड सीएफएक्स 96, बायोर लाइनजेन 9600.

6. स्वीकार्य नमूने

खाद्य संवर्धन शोरबा, उल्टी, दस्त के नमूने आदि।

7. परिचालन प्रक्रिया

1) न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण

उचित निकासी किट का उपयोग करके नमूनों से डीएनए निकालें।यह सिफारिश की जाती है किडीएनए को लगभग 100μl के साथ विघटित किया जाता हैएलुशन बफर का(टीईयान्यूक्लेज़ मुक्त एच₂ओ)के अंतिम चरण मेंनिकासी.शुद्ध न्यूक्लिक एसिड को तुरंत इस्तेमाल किया जाना चाहिए या -20°C पर संग्रहीत किया जाना चाहिए।

2) सकारात्मक नियंत्रण तैयारी

पॉजिटिव कंट्रोल को रिहाइड्रेशन से पहले परिवेश के तापमान पर 12 महीने तक रखा जा सकता है। इसे उपयोग से पहले 250 μl TE बफर या न्यूक्लेज़ मुक्त H जोड़कर रिहाइड्रेट किया जाना चाहिए।₂O, 15-20 सेकंड के लिए कम गति पर घुमावदार और 15-20 सेकंड के लिए कम गति पर केन्द्रापसारित। तुरंत उपयोग करें या -20°C पर स्टोर करें।

3) रीयल-टाइम पीसीआर मिश्रण तैयारी

A) वैक्यूम पैकेज खोलें और अभिकर्मक युक्त 8-ट्यूब स्ट्रिप्स निकालें। जांचें कि गोली ट्यूब के नीचे है (यदि आवश्यक हो तो आवश्यक ट्यूबों की संख्या काट लें) ।यदि प्रदान किए गए ट्यूब आपके उपकरण के साथ संगत नहीं हैं, रिएजेंट पेलेट को अपने उपकरण के साथ संगत एक ऑप्टिकल ट्यूब में स्थानांतरित करें।

B) ट्यूबों को खोलें और ढक्कन (रियल-टाइम पीसीआर मशीनों के लिए उपयुक्त नहीं) को फेंक दें, और नीचे के रूप में बर्फ पर प्रतिक्रिया मिश्रण तैयार करें।

* न्यूक्लेज़ मुक्त पानी का उपयोग नकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया जा सकता है।

सी) वास्तविक समय पीसीआर के लिए उपयुक्त टोपी (स्ट्रिप्स) का उपयोग करके पीसीआर को कैप करें ((प्रदान नहीं किया गया है) ।

घ) ट्यूबों को 10 से 15 सेकंड के लिए कम गति से घुमाएं, और 20 सेकंड के लिए 3000 आरपीएम पर सेंट्रिफ्यूज करें और उन्हें वास्तविक समय पीसीआर उपकरण में रखें।

2) आरटी-पीसीआर सेटअप

प्रतिक्रिया मात्रा को 25μl पर सेट करें, और पीसीआर प्रवर्धन प्रक्रिया नीचे दी गई है। 60 °C पर एफएएम फ्लोरोसेंस एकत्र करें, और निष्क्रिय संदर्भ के रूप में कोई भी चयन न करें।

3) परिणाम विश्लेषण और व्याख्या